Техніка зв’язаного імуноферментного аналізу – англійською Enzyme-Linked Immuno Assay – або тест ELISA – це імунологічний тест, який дозволяє виявляти або аналізувати молекули в біологічному зразку. Він був концептуалізований і розроблений двома шведськими вченими, Пітером Перлманом і Євою Енгвалл зі Стокгольмського університету в 1971 році.

Молекули, які аналізуються методом ELISA, зазвичай є білками. Типи зразків включають рідкі біологічні матеріали – плазму, сироватку, сечу, перспірант – середовища для культур клітин або рекомбінантний білок – білок, який виробляється клітиною, генетичний матеріал якої було змінено шляхом генетичної рекомбінації – очищений у розчин.

Тест ELISA в основному використовується в імунології для виявлення та/або вимірювання присутності білків, антитіл або антигенів у зразку. Цей серологічний тест виявляє, зокрема, антитіла, які виробляє організм у відповідь на вірусне зараження.

Використання антитіл для діагностики інфекційних захворювань є специфічним і швидким методом. Техніка ELISA — це імуноферментна техніка, яка дає змогу візуалізувати на основі біологічного зразка реакції між антигеном — тілом, яке живий організм вважає чужорідним — і антитілом за допомогою кольорової реакції, спричиненої маркером ферменту — зазвичай лужна фосфатаза та пероксидаза – попередньо приєднані до антитіла. Кольорова реакція підтверджує ідентифікацію виділеної бактерії або наявність потрібного вірусу, а інтенсивність забарвлення дає вказівку на кількість антигенів або антитіл у даному зразку.

Існує чотири основних типи тесту ELISA:

• ІФА прямий, дозволяє виявити або виміряти антитіла. Він використовує лише первинне антитіло;
• ІФА непрямий, найбільш широко використовуваний, також дозволяє виявляти або аналізувати антитіла. Він використовує вторинне антитіло, що забезпечує кращу чутливість, ніж прямий ELISA;
• ІФА в конкурсі, дозволяє дозування антигенів. Виробляється шляхом конкуренції за зв’язки, він не використовує фермент;
• ІФА «в бутерброді», дозволяє дозування антигенів. Ця методика широко використовується в дослідженнях.

Тест ІФА використовується для:

• Знайти та виміряти антитіла в серології для діагностики інфекційних захворювань: вірусології, паразитології, бактеріології та ін.;
• Дозування білків у низьких концентраціях: специфічні дози певних білків плазми (імуноглобулін Е (IgE), феритин, білкові гормони тощо), онкомаркери тощо;
• Дозуйте малі молекули: стероїдні гормони, гормони щитовидної залози, ліки...

ІФА-тест використовується, зокрема, для діагностики багатьох інфекційних захворювань:

Венеричні захворювання (ЗПСШ)

Включаючи гепатит, сифіліс, хламідіоз та ВІЛ. Рекомендований органами охорони здоров’я, це основний скринінговий тест на СНІД: він показує наявність антитіл до ВІЛ і антигену р24 через шість тижнів після інфікування.

Регіональні або ендемічні захворювання

Жовта лихоманка, Марбургська вірусна хвороба (MVM), Ладенга, хвороба Лайма, Чикунгунья, лихоманка долини Ріфт, Ебола, лихоманка Ласса тощо.

Ковід-19

Тест ELISA, який проводиться більше ніж через 2-3 тижні після появи симптомів, дає змогу менш ніж за годину визначити наявність антитіл до SARS-CoV-2.

Вірусні збудники, що викликають внутрішньоутробні інфекції

Наприклад, токсоплазмоз, краснуха, цитомегаловірус, простий герпес.

Інші випадки

Але він також знайшов застосування у виявленні:

• Вагітності;
• Аутоімунні захворювання;
• Харчові алергени: кількісне визначення загального імуноглобуліну Е (IgE) допомагає в оцінці та лікуванні алергії;
• Гормональні збої;
• онкомаркери;
• Віруси рослин;
• І багато іншого

У рамках виявлення антитіл до SARS-CoV-2 пілотне дослідження, проведене в серпні 2020 року Інститутом Пастера, CNRS, Inserm та Паризьким університетом, підтверджує надійність тесту ELISA: обидва випробувані тести ELISA використовують весь білок N SARS-CoV-2 (ELISA N) або позаклітинний домен спайку вірусу (S) як цільові антигени. Ця методика дасть змогу ідентифікувати антитіла більш ніж у 90% випадків із дуже низьким рівнем хибнопозитивних результатів у 1%.

Тести Elisa, які проводяться в аналітичних лабораторіях за медичним призначенням, коштують близько 10 євро, і 100% відшкодовується медичним страхуванням.

Проводячи в безкоштовних інформаційних, скринінгових та діагностичних центрах (CeGIDD), вони можуть бути безкоштовними щодо ВІЛ та SARS-CoV-2.